漿膜腔積液檢查進(jìn)展
　　漿膜腔積液檢查的內(nèi)容日益增多，相關(guān)的實驗技術(shù)也不斷地提高，從以前化學(xué)及顯微鏡方法鑒別炎癥與非炎癥發(fā)展到用免疫學(xué)、生化學(xué)等方法鑒別引起漿膜腔積液的良性與惡性腫瘤甚至用液相色譜等手段對腫瘤進(jìn)行定位檢查，實驗方法和技術(shù)的進(jìn)步使疾病的診斷更為明確，現(xiàn)代的漿膜腔積液的實驗室檢查已成為臨床疾病診斷的重要手段。常用項目有：（1）新的滲出液與漏出液分類法：包括3個指標(biāo)：a.胸腹液LDH的比值＞0.6。b.胸腹蛋白同血漿蛋白比值＞0.5。c.胸腹液IgG，IgA比值＞0.5，提示為滲出液，大約90%的胸腹水滲出液顯示上述改變。（2）乳酸脫氫酶（LDH）活性測定，主要用于滲出液和漏出液的鑒別。（3）腺苷脫氫酶（ADA）總活性：對結(jié)核性積液的診斷有重要參考價值。（4）纖維連接蛋白（fibronectin， FN）對鑒別診斷惡性，非惡性腹水的準(zhǔn)確性達(dá)100%。惡性腹水FN顯著高于肝硬化腹水（P＜0.001 ）。（5）有人證實胸腔積液中的IBP含量可作為腫瘤性積液與結(jié)核性胸膜炎性積液的鑒別診斷指標(biāo)，胸水中的IBP＞1 500 mg/ml，則為腫瘤性積液的可能性較大。（6）經(jīng)研究證實，有93%結(jié)核性胸水患者胸水溶菌酶的含量同血清溶菌酶含量的比值＞1.0，而100%惡性胸水患者此比值＜1.0。（7）β2-MG蛋白對鑒別結(jié)核性積液和非結(jié)核性積液有一定的價值。另外風(fēng)濕性胸腔積液和淋巴瘤并發(fā)的胸腔積液中，其含量也會升高，尤以后者zui為顯著。但在其它疾病引發(fā)的胸腔積液，包括惡性腫瘤和系統(tǒng)性紅斑狼瘡，其中β2-MG均明顯低于結(jié)核病、風(fēng)濕病和淋巴瘤。（8）不同疾病漿膜腔積液中的纖維蛋白降解產(chǎn)物（FDP）含量不同，筆者的資料顯示，惡性腫瘤、結(jié)核性胸膜炎及腹膜胸腹水的FDP均值水平顯著高于肝硬化、肝癌。因此檢測胸腹水FDP，可以用作惡性腫瘤、結(jié)核與其他疾病診斷和鑒別診斷的指標(biāo)。（9）炎癥時C-反應(yīng)蛋白（CRP）結(jié)果較高，檢出率為100%，因為CRP是一種急性期反應(yīng)蛋白，當(dāng)由于炎癥而導(dǎo)致腹水或胸水形成時，其中CRP含量的檢測對炎癥的診斷有一定價值。
　　FCM用于漿膜腔積液檢查主要集中在3個方面：DNA含量分析，腫瘤細(xì)胞抗原的測定，淋巴細(xì)胞的免疫表型分析。
　　1.DNA含量分析：用FCM進(jìn)行單個細(xì)胞DNA定量，臨床上主要用于細(xì)胞遺傳學(xué)和細(xì)胞動力學(xué)的研究。從分子生物學(xué)角度，將增殖周期分為四個階段，第1階段為DNA復(fù)制前期（G1期）此階段DNA含量為2N，第2階段為DNA復(fù)制期（S期），此期DNA含量在2～4N之間，一旦DNA含量為4N，即進(jìn)入G2期，第四階段為分裂期。因此，F(xiàn)CM DNA定量可將形態(tài)上不易區(qū)別的群體細(xì)胞分成3個群（即G，S和G2期），這3個群體細(xì)胞對不同的化療藥物反映不同。因此，細(xì)胞動力學(xué)的研究可利用藥物的選擇，療效的觀察及愈后的估計。另外腫瘤細(xì)胞多存在染色體的數(shù)目變化，也即DNA含量的不同。研究證明腫瘤細(xì)胞DNA含量不同，DNA指數(shù)的不同與腫瘤惡性程度有關(guān)，并可預(yù)示某些疾病的愈后。有文獻(xiàn)報告，將組織學(xué)證明的淺表胃炎，慢性萎縮性胃炎和晚期胃癌細(xì)胞做FCM DNA分析結(jié)果顯示：三者DNA非倍體分別為0（0/10例），20%（2/10例）和90%（36/40例），因此用FCM進(jìn)行漿膜腔積液內(nèi)細(xì)胞DNA測定屢有報告。Huang等對71例腫瘤患者檢測顯示，對惡性胸水診斷敏感性為52%，特異性為100%。若與脫落細(xì)胞檢查聯(lián)合應(yīng)用，則可使診斷敏感性達(dá)94%，F(xiàn)CM定的S期細(xì)胞比例是部分腫瘤的重要預(yù)后指標(biāo)。胸液中非整倍體腫瘤S期比例較二倍體腫瘤比例明顯增高。其中位生存期明顯縮短，Bartal等還觀察了惡性胸水局部治療前后FCM所顯示的胸水細(xì)胞DNA倍體特征，發(fā)現(xiàn)患者臨床癥狀改善與胸液細(xì)胞DNA倍體水平的變化相關(guān)，說明倍體分析亦是評價治療效果的較好指標(biāo)。Hedley等提示：在細(xì)胞學(xué)檢查陽性的惡性胸腔積液中，含有異倍體細(xì)胞的病人愈后差，其中位生存期與那些僅有二倍體細(xì)胞的病人相比為1.5∶4。
  2.腫瘤細(xì)胞抗原的測定：免疫細(xì)胞化學(xué)研究證實，利用FCM檢測上皮膜抗原（EMA），癌胚抗原（CEA），細(xì)胞角蛋白（Keratin）等對惡性胸水的診斷及鑒別診斷有一定的價值。Czerniak等將胸液細(xì)胞用酒精或甲醛固定后暴露于抗Cal抗原（僅出現(xiàn)于腫瘤細(xì)胞）的單克隆抗體液中，然后再與結(jié)合了異硫氰酸熒光素（FITC）的羊抗鼠免疫球蛋白，通過FCM檢測一定數(shù)量細(xì)胞的熒光強度，發(fā)現(xiàn)14/17例惡性胸腔積液中，熒光強度明顯高于對照組，而25例良性胸水液中無一例增強。
  3.胸腔液淋巴細(xì)胞的免疫表型分析：淋巴細(xì)胞特別是T淋巴細(xì)胞的某些胸膜疾病中起著非常重要的作用。研究胸腔積液淋巴細(xì)胞的表現(xiàn)型，已成為許多專家的焦點。Ainslie等使用FCM證實TB胸水中富集CD4陽性T細(xì)胞，其比例與外周血相比有明顯升高。胸水中CD4/CD8為3.92，而外周血僅為1.21。Barnes等利用FCM分選技術(shù)，將CD4陽性細(xì)胞分為兩個亞群；CD4+CDw29+和CD4+CDw29-，結(jié)果顯示：在TB性胸水中主要是CD4+CDw29+T細(xì)胞，并產(chǎn)生γ干擾素，在對人類TB菌白細(xì)胞介導(dǎo)的局部免疫反應(yīng)中，起一個重要的作用。